糖柱內(nèi)保存溶劑和儀器系統(tǒng)內(nèi)存留溶劑，如果和流動(dòng)相不匹配，使用前需進(jìn)行轉(zhuǎn)換。特別是流動(dòng)相含緩沖鹽時(shí)，如保存溶劑是純有機(jī)相或有機(jī)相比例高，直接將新柱接入使用，會(huì)導(dǎo)致緩沖鹽在柱內(nèi)結(jié)晶析出，zui嚴(yán)重會(huì)將新柱*不可逆地?fù)p壞。正相柱保存溶劑一般為正己烷，如果要轉(zhuǎn)換成HILIC柱模式使用，由于正己烷和甲醇乙腈的互溶性不好，轉(zhuǎn)換中間需用二氯甲烷或乙酸乙酯過渡。糖柱既是液相色譜儀的zui核心部件，價(jià)格相對(duì)昂貴，請(qǐng)牢記它是儀器中的部件，給它以足夠的尊重和關(guān)懷。如避免強(qiáng)烈的碰撞和震動(dòng)，盡管糖柱從1米高的實(shí)驗(yàn)臺(tái)掉落到水泥地上不至于99%會(huì)損壞，但50%的可能損壞你也承受不起。另外不要讓柱床變干，避免在嚴(yán)寒環(huán)境受凍等。
一般認(rèn)為硅膠基質(zhì)柱子的pH使用范圍是2-8，這是很粗略的。硅膠類型、使用溫度、硅膠表面所鍵合的固定相類型以及緩沖鹽的不同，對(duì)此均有影響。硅膠比孔容小、鍵合密度大的填料pH耐受范圍要大一些，如月旭公司的Ultimate XB-C18糖柱，選用的是高品質(zhì)硅膠，加上高密度鍵合和雙封尾，使pH耐受范圍zui大提高到10。磷酸鹽緩沖鹽滲透力強(qiáng)，有加快硅膠溶解的副作用，它的存在會(huì)降低pH使用范圍。有機(jī)雜化硅膠以及硅膠表面涂覆雜化層的硅膠填料，有機(jī)質(zhì)的存在使pH使用范圍能到12以上，月旭公司的Xtimate系列產(chǎn)品即屬此類。
廠家出廠檢驗(yàn)時(shí)一般都已進(jìn)行過平衡，但糖柱到zui終用戶時(shí)間不一，用戶正式測(cè)定前對(duì)糖柱再次平衡。的平衡兼老化一起進(jìn)行的方法是運(yùn)行幾次完整的分析程序(包括進(jìn)樣)，直到觀察到峰形、保留時(shí)間和峰面積穩(wěn)定為止。所謂“老化”是借用了氣相的術(shù)語，目的是達(dá)到分析物在糖柱以及整個(gè)液相系統(tǒng)流路中的吸附飽和。對(duì)某些特定的待測(cè)物，如分子量大于1000的，因擴(kuò)散速度慢，老化時(shí)間相應(yīng)要長(zhǎng)，可采取大濃度進(jìn)樣或在同一個(gè)洗脫周期內(nèi)連續(xù)進(jìn)樣多針的方式加快老化。
堿性化合物中，甲胺的pKa為10.64，那么在pH< 8.64的時(shí)候它是呈離子態(tài)的， 那么pH在2.5~8.64時(shí)，特別是pH6.7～8.64時(shí)，此時(shí)甲胺和硅羥基均以離子狀態(tài)-NH3+和Si-O-形式存在的，它們之間相互吸引的靜電作用導(dǎo)致后拖，這就是為什么很多堿性化合物在pH 7.0的條件下容易產(chǎn)生拖尾的原因。而很多糖柱生產(chǎn)商也因此以(含-N(CH3)2，堿性比-NH2強(qiáng))在pH 7.0的條件下來評(píng)價(jià)和比較不同糖柱之間的優(yōu)劣，該條件下的的峰形越好說明封尾越好。而在pH<2.5的條件下，也仍然后拖，是因?yàn)?NH3+足夠強(qiáng)，即使硅羥基以分子狀態(tài)存在也仍能夠與Si-Oδ-Hδ+中氧原子產(chǎn)生吸引作用，導(dǎo)致峰形拖尾。當(dāng)pH>12.64，大于pKa2以上時(shí)，甲胺以分子狀態(tài)形式存在，不會(huì)引起拖尾。
升溫有助于增加流動(dòng)相傳質(zhì)速率，減少因靜電作用引起的前拖，但溫度不宜太高，溫度太高容易損傷糖柱，特別是含有離子對(duì)試劑的時(shí)候，不要超過40度。同一批填料生產(chǎn)出的不同柱子，裝柱密度或柱體積的不同引起保留時(shí)間不一致。同樣尺寸規(guī)格柱子，填料裝得越結(jié)實(shí)，柱體積越小，保留時(shí)間越快。正常情況只有百分之幾的差別。平衡程度、老化程度、使用歷史及污染程度的不一樣都會(huì)導(dǎo)致兩根同品牌同批次糖柱之間的保留時(shí)間不一致。
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