詳述
弱極性色譜柱的沖洗保存要點(diǎn)
對(duì)使用后對(duì)弱極性色譜柱，沖洗保存*，使用緩沖系統(tǒng)的尤其要注意。推薦反相色譜系統(tǒng)的通用沖洗流程：
將所有通道置換成含有較低有機(jī)相比例的水相中，比如10-30%乙腈或甲醇，然后沖洗1個(gè)小時(shí)，然后再梯度增加有機(jī)相比例，各沖洗一定時(shí)間，終保留在高有機(jī)相比例的沖洗液里。低有機(jī)相比例的沖洗液是為了盡可能地沖洗緩沖鹽。通常低壓梯度洗脫的液相色譜儀采用的是四元泵，就是單泵四通道，比例閥混合。這種混合方式有個(gè)弊端，就是混合效果差，因?yàn)楦魍ǖ啦煌壤峭ㄟ^開關(guān)各通道閥的時(shí)間來控制的。往往是兩通道混合，就算沒有用緩沖鹽，還是建議先按比例混合好了，然后走單通道，否則的話一樣會(huì)造成鹽析出，或者基線波動(dòng)。走梯度洗脫的話，往往會(huì)把有機(jī)相通道中加入一定比例的水，或者把水相通道配成梯度洗脫的初始比例，把有機(jī)相通道配成梯度洗脫終的比例。
這里有兩點(diǎn)需要說明：
1.一般認(rèn)為，色譜系統(tǒng)包括弱極性色譜柱的沖洗甚至保存，都可以使用流動(dòng)相，只是不加緩沖鹽、酸堿等。有一些品牌色譜柱，建議如果不是含鹽或者強(qiáng)酸強(qiáng)堿，一般不建議沖洗。不過這只適合短期保存，也就是沒隔多久又要再次使用。長期不用的色譜系統(tǒng)包括色譜柱還是應(yīng)該沖洗后保存在高比例低極性溶劑體系中。一般建議正相系統(tǒng)保存在正已烷：異丙醇=90：10，反相系統(tǒng)保存在乙腈：水=90：10或者99%乙腈中。
2.隨著快速分離色譜柱的發(fā)展，很多的低粒徑色譜柱得到應(yīng)用，而且往往柱溫也較高，通常達(dá)到50度或以上，這種色譜系統(tǒng)通常柱壓也較高，貿(mào)然用高比例水相沖洗可能會(huì)導(dǎo)致系統(tǒng)超壓。可以先用流動(dòng)相沖洗，或者斷開色譜柱，用高比例水相沖洗系統(tǒng)，再接上柱子逐步提高有機(jī)相比例沖洗，也可以先調(diào)低流速?zèng)_洗。而且，待沖洗快要結(jié)束時(shí)再降低柱溫。
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