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哮喘小鼠氣道反應(yīng)性檢測(cè)方法的建立

2025年05月30日 09:08:07      來源:上海玉研科學(xué)儀器有限公司 >> 進(jìn)入該公司展臺(tái)      閱讀量:7

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  采用雞卵清蛋白(OVA)致敏和激發(fā),建立BALB/c 小鼠哮喘模型。具體分生理鹽水對(duì)照組和哮喘模型組,每組18 只,分成10 只及8 只兩部分,分別用和有創(chuàng)的方法測(cè)定氣道反應(yīng)性(分別用Penh-asthma組、Penh-ns 組、RI-asthma 組、RI-ns 組表示)經(jīng)相應(yīng)致敏激發(fā)后,用小鼠檢測(cè)其氣道反應(yīng)性。霧化吸入0.2~50 mg/ml 倍增濃度的乙酰甲激發(fā),測(cè)定相應(yīng)濃度下的增強(qiáng)的呼氣間歇(Penh)值或氣道阻力(RI)值等指標(biāo)。所有動(dòng)物都行支氣管肺泡灌洗,收集灌洗液,涂片染色后分類計(jì)數(shù)。最后測(cè)得 Penh-asthma、RI-asthma 組的嗜酸粒細(xì)胞(%)為55.00±1.41,顯著高于對(duì)照組的0.44±0.62(P<0.01)。Penh-asthma 組PC100 均 ≤6.25 mg/ml,對(duì)照組PC100 均≥12.5 mg/ml。同時(shí),其Log2(10PC100)值(5.36±0.84)顯著低于對(duì)照組(7.97±0.82),兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。Penh-asthma組從Mch 為3.12 mg/ml 開始,其Penh 值明顯高于對(duì)照組。RI-asthma 組的RI 值從0.39 mg/ml 開始就明顯高于相應(yīng)對(duì)照(P<0.05)。Penh-asthma 組與 RI-asthma 組的氣道反應(yīng)性相關(guān)(r=0.962,P<0.01)。

  因此從氣道炎性指標(biāo)上看,Penh-asthma 組和RI-asthma 組的嗜酸粒細(xì)胞明顯高于各自的對(duì)照組(P<0.01)。而本實(shí)驗(yàn)所制作的模型是參照我所于2006 年已成功制作的支氣管哮喘模型,說明該模型的氣道炎性有良好的重復(fù)性。而在氣道高反應(yīng)性的檢測(cè)上,從PC100 的分布上看,Penh-asthma 組出現(xiàn)Penh倍增的Mch 濃度級(jí)都集中在低水平(PC100 均≤3.12 mg/ml),而對(duì)照組的明顯集中在高濃度水平(PC100均≥25 mg/ml);Penh-asthma 組Log2(10PC100)值顯著低于對(duì)照組(P<0.01),強(qiáng)烈支持Penh- asthma組存在氣道高反應(yīng)性,也體現(xiàn)了Penh 良好的檢測(cè)效能。而將反映Penh-asthma 組和RI-asthma 組的氣道反應(yīng)性的 Penh 值和RI 行相關(guān)分析,結(jié)果非常接近1(P<0.01),這就證實(shí)了2 種方法密切相關(guān)。此外,在檢測(cè)小鼠氣道反應(yīng)性過程中,行法的小鼠不必麻醉,而且每次可以同時(shí)檢測(cè)6 只小鼠,動(dòng)態(tài)觀察也不受限;這些在有創(chuàng)法中都無法實(shí)現(xiàn)。綜上所述,以Penh 為主要測(cè)定指標(biāo)的肺功能檢測(cè)方法作為 BALB/c 雌鼠氣道高反應(yīng)性的檢測(cè)可行、高效。

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