艾信條碼與艾信納米粒相結(jié)合，實現(xiàn)高靈敏度多路復(fù)用檢測

發(fā)布：2021-12-23　點擊：12

摘要

基于光學編碼微球的懸浮陣列技術(shù)在基因分析、蛋白譜分析、早期疾病診斷、治療監(jiān)測等方面的多路檢測受到了廣泛的關(guān)注。但條碼的熒光穩(wěn)定性和檢測靈敏度有待進一步提高，以滿足日益增長的“精準診斷”需求。

方法:本工作報道了一種基于極穩(wěn)定的AIEgens(AIE33和AIE NIR800)微球作為條形碼，AIEgens1,1,2,3,4,5-六苯基- 1h -silole, HPS)微球作為熒光信號報告器，并結(jié)合流式細胞儀進行多路檢測的新型懸浮陣列平臺。

結(jié)果:由于HPS納米粒具有良好的熒光信號放大效應(yīng)，與QDs納米粒(提高3倍)和商業(yè)有機染料藻紅蛋白(提高5倍)作為熒光信號報告物的多重檢測方法相比，我們的多重檢測方法具有更高的檢測靈敏度。

結(jié)論:此外，驗證實驗顯示，在患者血清樣本中檢測過敏原的臨床金標準方法與ImmunoCAP相似，該懸浮陣列平臺具有良好的熒光穩(wěn)定性和較強的信號放大能力，具有高靈敏度多路生物檢測的應(yīng)用前景。

關(guān)鍵詞:聚集誘導(dǎo)排放; AIEgens條形碼;AIEgens納米粒;多路檢測過敏原

介紹：

利用光學編碼微球的懸浮陣列在高通量多路檢測中發(fā)揮了突出的作用，由于其快速結(jié)合動力學、高通量多路檢測和高檢測靈敏度，是基因分析、蛋白譜分析、早期疾病診斷和治療監(jiān)測的強大工具。熒光編碼微球通常被用作固體載體和跟蹤碼，以實現(xiàn)對多個目標的并行檢測，是懸浮陣列中使用的主要技術(shù)之一。熒光編碼微球的理想性能是編碼容量大、均勻性好、熒光穩(wěn)定性高。高檢測靈敏度對于低濃度蛋白或其他生物分子對疾病的早期準確診斷也非常重要。雖然目前的懸架陣列技術(shù)比傳統(tǒng)的檢測平臺具有更高的檢測靈敏度，但靈敏度還需要進一步提高，以滿足“精準診斷”日益增長的需求。

結(jié)論

綜上所述，我們將AIEgens引入到懸浮陣列中，并成功構(gòu)建了一種基于AIEgens微珠作為條形碼、AIEgens納米粒作為熒光信號報告器、單激光激發(fā)流式細胞儀進行多路檢測的新型懸浮陣列平臺。我們利用簡易的Shirasu多孔玻璃(SPG)膜乳化方法，通過簡單地改變SPG膜的孔徑，合成了AIEgens條形碼和AIEgens納米粒。制備的微球粒徑分布窄，熒光均勻性好，熒光穩(wěn)定性好。它們的熒光強度也非常穩(wěn)定，即使在高酸性和高堿性的溶液中，證明了在報道的光學編碼珠中具有的熒光穩(wěn)定性。我們通過改變AIEgens (HPS, AIE41, AIE33和AIE NIR800)的發(fā)射波長和發(fā)光強度水平，成功地制作了一個包含30個基于“單波長”編碼方法的二維AIEgens條形碼庫。此外，我們將AIE33和AIE NIR800微珠條形碼和HPS微珠熒光信號報告儀結(jié)合在流式細胞儀上檢測單一樣本中5種常見的過敏原。使用AIEgens納米粒作為熒光信號報告器的多重檢測方法與使用商業(yè)化的藻紅蛋白有機標簽(提高5倍)和QDs納米粒(提高3倍)作為報告器的多重檢測方法相比，具有更高的檢測靈敏度。表明HPS納米粒具有良好的熒光信號放大效應(yīng)。通過檢測95例患者樣本獲得的結(jié)果表明，與目前的臨床免疫cap金標準方法相比，每種過敏原在靈敏度和特異性方面都實現(xiàn)了類似的檢測特性。結(jié)果表明，基于具有優(yōu)異熒光穩(wěn)定性的AIEgens微球和具有較強信號放大能力的AIEgens納米球的懸浮陣列平臺具有良好的生物應(yīng)用前景，未來可應(yīng)用于其他蛋白質(zhì)、核酸和細胞因子。

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